Metode dijagnosticiranja HIV infekcije. Ciljevi testiranja i probira na HIV Što je probir na HIV
Probir - utvrđivanje učestalosti neprepoznatog morbiditeta pomoću testona velike brzine. Probir u pravilu podrazumijeva rutinsko testiranje cijele populacije ili pojedinih skupina unutar populacije. Serološki test za prisutnost protutijela na HIV u ljudi postao je široko dostupan od 1985. U masovnoj praksi testiranja i probira najčešće se koriste metode enzimskog imunotestiranja, koje, međutim, mogu dati i lažno pozitivne i lažno negativne rezultate.
Ovi testovi razvijeni su u svrhu ispitivanja darovane krvi i stoga su toliko osjetljivi da će se vjerojatno pogrešno zamijeniti da daju pozitivan, a ne negativan rezultat. Ako je rezultat testa pozitivan, darovana krv se mora uništiti. Što se tiče samog donora, on prolazi kontrolno testiranje. Lažno negativni rezultati testa prvenstveno ovise o tome da je inkubacija HIV infekcije 1-3 mjeseca (u prosjeku 6 tjedana). U tom razdoblju osoba je već nositelj virusa (a time i zarazna), što međutim test na antitijela na HIV ne otkriva. Ponekad to "nevidljivo razdoblje" (ili, kako se još naziva, "skriveno razdoblje kruženja virusa") može trajati i do tri godine.
Jasno je da probir cijele populacije na HIV neće biti učinkovit. Osobito tamo gdje je prevalencija HIV infekcije niska, testiranje će proizvesti više lažno pozitivnih rezultata. nego doista pozitivnih rezultata. Također je potrebno uzeti u obzir i najjače stresove za umišljene seropozitivce, koji ponekad dovode do jatropsihogenija (vrsta neuroza), porasta "speedofobijskih" raspoloženja u društvu, sukoba u komunikaciji, i konačno - nerazumnog rasipanja financijskih sredstava ( jedan test košta oko jedan dolar).
Mogućnost testiranja na prisutnost antitijela na HIV treba omogućiti svima. U današnjem društvu testiranje može biti dobrovoljno i obvezno. Na ekstnasumično anonimno testiranje pacijent je upisan pod brojem; pritom je dopušteno navesti demografske podatke (dob, spol), ali se u dokumente ne upisuje ni prezime ni adresa subjekta. Na dobrovoljno povjerljivosocijalno testiranje podaci o identitetu pacijenta odražavaju se u njegovoj medicinskoj dokumentaciji, ali se pacijentu moraju dati jamstva o neotkrivanju podataka.
Testiranje na HIV nužno mora biti popraćeno savjetovanjem pacijenata prije i poslije testiranja. Adekvatno informiranje pacijenta ponekad postaje najbolja psihoterapija. Ovisno o individualnim psihološkim karakteristikama svakog pacijenta, preporučljivo je obavijestiti ga da medicinska literatura više puta izvještava o slučajevima u kojima redovita seksualna aktivnost s partnerom zaraženim HIV-om dugi niz godina nije dovela do infekcije; što su lažno pozitivni rezultati testa; da pozitivan nalaz ne znači AIDS; da medicina poznaje slučajeve kada se AIDS ne razvije kod "HIV pozitivnih" više od 10 godina i tako dalje.
Najgrublje kršenje profesionalne etike bit će poruka pacijentu o pozitivnom nalazu testa koji još nije potvrđen ponovnom analizom, a kojoj nije prethodilo kompetentno savjetovanje. Pacijenti se konačno informiraju o rezultatima testa tek nakon potvrde pozitivnih rezultata testa. To se radi kako bi se izbjegli tragični slučajevi, poput onog koji se dogodio u Rigi 1991.: supružnici su, saznavši za pozitivan rezultat testa jednog od njih, počinili samoubojstvo; post mortem studije nisu otkrile činjenicu zaraze HIV-om.
Problem obvezno testiranje i probir na HIV izaziva burnu raspravu, u kojoj se isprepliću znanstveni i epidemiološki, moralno-etički, pravni, socioekonomski pa i politički aspekti. Mnoge su zemlje usvojile obvezni probir krvi, sjemena, drugih tkiva i organa darivatelja na HIV. Od 1985. godine SAD uvodi obvezno testiranje u vojsci (2 milijuna novaka, vojnog osoblja i rezervista godišnje podliježe obveznom testiranju na HIV). Neke države zahtijevaju testiranje na AIDS prije braka, a od 1997. država New York uvela je obvezno testiranje na HIV za svu novorođenčad. i U Sjedinjenim Državama postoje mnogi propisi o obveznom testiranju na HIV koji ovu zemlju izdvajaju od ostalih.
U Japanu je tek 1994. Ministarstvo rada preporučilo poslodavcima da odustanu od obaveznog testiranja za zapošljavanje. No, obvezno testiranje moraju obaviti zaposlenici koje tvrtke upućuju na rad u zemlje čije zakonodavstvo zahtijeva od stranaca da imaju potvrdu o odsutnosti HIV infekcije i AIDS-a. U tim slučajevima postojanje pozitivnog rezultata testa znači da takav zaposlenik neće biti poslan u inozemstvo, ali je uprava tvrtke dužna jamčiti da će on zadržati posao u zemlji.
Općenito, mnogi inozemni stručnjaci smatraju da praksa obveznog testiranja na HIV ne samo da krši ljudska prava, već se pokazuje i neučinkovitom kao prepreka širenju epidemije, te stoga njezinu primjenu treba prilično ograničiti. WHO također ne podržava praksu obveznog testiranja.
Kod nas je obvezno prijavljivanje slučajeva AIDS-a uvedeno 19H5 od trenutka otkrivanja prvog slučaja bolesti (Švedska je bila prva zemlja koja je 1983. godine donijela zakon o obveznom prijavljivanju svih slučajeva ove bolesti). U početnoj fazi, politika borbe protiv AIDS-a u SSSR-u bila je gotovo u potpunosti svedena na obvezni pregled. Tako je u Dekretu Prezidija Vrhovnog sovjeta SSSR-a usvojenom 1987. godine "O mjerama za sprječavanje infekcije virusom AIDS-a", rečeno da se od državljana SSSR-a i stranaca koji se nalaze na njegovom teritoriju može zahtijevati da se podvrgnu liječnički pregled na infekciju virusom AIDS. Prema Uredbi, svjesno dovođenje druge osobe u opasnost od zaraze AIDS-om kažnjavalo se kaznom zatvora do 5 godina, a samozaraza do 10 godina.
U "Pravilima za liječnički pregled za otkrivanje infekcije virusom AIDS-a" koje je izdalo Ministarstvo zdravstva SSSR-a na temelju ove Uredbe navedeno je da pregledu podliježu: davatelji (krvi i drugih tkiva); sovjetski državljani koji su se vratili iz inozemna poslovna putovanja u trajanju od više od 1 mjeseca; stranci koji su stigli u SSSR na razdoblje dulje od 3 mjeseca iz zemalja u kojima je AIDS uobičajen: osobe iz "rizičnih skupina" (stalni primatelji darovane krvi, ovisnici o drogama, homoseksualci i prostitutke) ); osobe "koje su bile u kontaktu s bolesnicima ili nosiocima virusa" Na kraju popisa navedene su osobe koje su izrazile želju da se podvrgnu takvom pregledu.
Ti su dokumenti opjevali zakonsku osnovu za probir darovane krvi na HIV, koji se u zemlji zapravo provodi od 1986. godine, te praksu medicinskih epidemioloških ispitivanja, koja su neko vrijeme u našoj zemlji imala vodeću ulogu u otkrivanju širenja virusa. HIV infekcije. U oba dokumenta skreće se pozornost na normu koja je dopuštala primjenu mjera prisile prema građanima koji izbjegavaju obvezno testiranje, izravno od strane zdravstvenih vlasti ili policije, bez sudjelovanja predstavnika tužiteljstva ili suda. Teško da je zastrašivanje stanovništva kaznenom odgovornošću za "svjesno dovođenje druge osobe u opasnost od zaraze" imalo ikakav drugi smisao osim samozadovoljstva zdravstvenih djelatnika koji su nastojali kod predstavnika najviše vlasti ostaviti dojam da su poduzimanje učinkovitih mjera za borbu protiv AIDS-a.
Realnije mjere za takvu borbu poduzeli su sami epidemiolozi i kliničari. Tako je na njihovu inicijativu, u veljači 1987., All-Union Radio najavio otvaranje anonimne sobe za testiranje na AIDS u Moskvi. Nekoliko dana kasnije ovaj ured je počeo s radom, primajući i do tisuću ljudi mjesečno.
Pokrenut 1986. godine u našoj zemlji, obvezni probir HIV-a velikih kontingenata stanovništva stalno se širi. Štoviše, suprotno normama koje je donijelo Ministarstvo zdravstva SSSR-a, ponegdje je, na temelju odluka donesenih na lokalnoj razini, uvedeno obavezno testiranje na HIV svih pacijenata primljenih u bolnice (osobito kirurške). Kao rezultat toga, više od 95 milijuna testova na HIV provedeno je između 1987. i 1992. godine. Kakva je bila učinkovitost tako opsežne prakse? Tijekom rutinskih pregleda oko 29 milijuna donora nije identificirano kao zaraženo; od više od 27 milijuna testiranih trudnica, 30 ih je zaraženo; od 2 milijuna oboljelih od spolnih bolesti - 58 zaraženih; od gotovo 2 milijuna zatvorenika - 3 zaražena itd. Anonimnom anketom obuhvaćeno je samo 356.942 osobe, a identificirano je 13 osoba zaraženih HIV-om.
Ako se prisjetimo da jedan test košta zdravstveni proračun jedan dolar, onda postoje ozbiljne sumnje u opravdanost trošenja tako značajnih sredstava na tako neučinkovite intervencije. Poznato je da je u većini drugih zemalja strategija borbe protiv AIDS-a drugačija: odgovarajuća edukacija stanovništva, programi osposobljavanja određenih društvenih skupina za sigurne oblike ponašanja, svako moguće poticanje ljudi koji imaju razloga brinuti za svoje zdravlje da se podvrgnu dobrovoljno testiranje na HIV i dr.
Navedeno nipošto ne znači potpuno negiranje svrhovitosti obveznog testiranja na HIV za pojedine skupine stanovništva.
Odvojenu raspravu zaslužuje tzv. široko korišten u našoj zemlji. "epidemiološka metoda ispitivanjaniya". Epidemiološko istraživanje je utvrđivanje izvora zaraze i svakog slučaja zaraze, po mogućnosti uspostavljanje cjelokupnog "lanca" prijenosa zaraze i ujedno poduzimanje mjera za sprječavanje širenja zaraze.
U našoj zemlji metodom epidemiološkog istraživanja u razdoblju od 1987. do 1989. godine identificirano je do 70% svih osoba zaraženih HIV-om. Upravo zahvaljujući korištenju ove metode dokazan je nozokomijalni prijenos HIV infekcije u južnoj Rusiji.
U tom su razdoblju ispitani svi koji bi mogli imati barem neke veze sa širenjem zaraze; prikupljena je velika količina jedinstvenog znanstvenog materijala - serumi i limfociti dobiveni su od gotovo svih zaraženih ljudi, a uzorci su uzeti više puta od mnogih pacijenata, što je važno za proučavanje varijabilnosti virusa.
U zemljama u kojima je testiranje na HIV uglavnom dobrovoljno, to jednostavno ne bi bilo moguće. Može se ustvrditi da su domaći liječnici u ovom slučaju uspješno riješili najakutniji javnozdravstveni problem - žarište zaraze lokalizirano je u roku od 10 mjeseci - te proveli vrlo važan program znanstvenog istraživanja.
Početkom 1990-ih, mnogi medicinski stručnjaci i predstavnici društvenih pokreta (već tada su se u našoj zemlji počele formirati javne organizacije koje pružaju psihološku i socijalnu podršku osobama zaraženim HIV-om) shvatili su ograničenja strategije koja se temelji na obveznom pregledu (uglavnom testiranju) ogromnih mase stanovništva. Načelu dobrovoljnosti testiranja počelo se posvećivati sve više pozornosti, i to ne samo zato što je "prihvaćeno u civiliziranim zemljama", već i zbog atraktivnosti samog načela i za pacijente i za liječnike.
Kao rezultat toga, Savezni zakon "O sprječavanju širenja i Ruske Federacije bolesti uzrokovane infekcijom virusom ljudske imunodeficijencije (HIV)" donesen 1995. zahtijeva obvezno testiranje na AIDS "partnera" 1 Obvezno profilaktičko promatranje HIV-a zaraženih osoba u zdravstvenim ustanovama također je ukinut. Prema ovom Zakonu zdravstveni pregled na HIV infekciju provodi se dobrovoljno, a na zahtjev pregledane osobe anonimno. Obveznom testiranju na SIDU podliježu samo darivatelji krvi, biološke tekućine, organa i tkiva, kao i predstavnici pojedinih profesija (prije svega liječnici).
Uobičajena dijagnostička metoda danas je probir. HIV je na ovaj način lako otkriti čak i na rani stadiji. Uz pomoć takve studije moguće je utvrditi prisutnost antitijela na to u krvi pacijenta opasna bolest. Koja se probirna dijagnostika HIV-a koristi u modernoj medicini i što trebate znati o njoj?
Metoda probira za dijagnosticiranje HIV infekcije: opis
Do danas se koristi niz različitih reagensa za studije probira, uz pomoć kojih je moguće dijagnosticirati virus imunodeficijencije. Prije nekoliko godina za to su korišteni enzimi treće generacije. Njihova učinkovitost i osjetljivost nisu bile dovoljno visoke. Reagensi četvrte generacije koji se trenutno koriste pokazuju najbolje rezultate. Uz njihovu pomoć moguće je identificirati i ag na HIV 1, 2 (probir se provodi u laboratoriju). Glavna prednost ove vrste studije je sposobnost otkrivanja ne samo antitijela, već i antigena. To omogućuje medicinskim stručnjacima da utvrde kojom je vrstom HIV infekcije osoba zaražena. Uz pomoć takvog pregleda na HIV infekciju također je moguće identificirati nositelje virusa kod kojih se on ne manifestira, ali se može prenijeti na druge ljude.
Najčešći test koji se koristi za otkrivanje ove bolesti u javnim i privatnim ustanovama je ELISA test. Preporuča se provesti tri do četiri tjedna nakon infekcije. Riječ je o oko nezaštićeni kontakti s novim partnerom, transfuzijom krvi i tako dalje.
Što još trebam znati o testovima probira na HIV?
Važno je znati da se takva studija provodi dodavanjem krvi pacijenta na indikator s posebnim reagensima. Uzorkovanje krvi se provodi na prazan želudac. Od posljednjeg obroka prije testiranja mora proći najmanje osam sati.
Probirni test u dijagnostici HIV infekcije ima važnu ulogu. Pomoću nje možete odrediti prisutnost ili odsutnost virusa imunodeficijencije u ranim fazama.
Rezultati takvog istraživanja mogu biti pozitivni, negativni i upitni. Potonji su izuzetno rijetki. Sumnjiv rezultat ukazuje na pogrešan postupak ili reagense loše kvalitete. U slučaju pozitivnog rezultata, dodatna istraživanja. Govorimo o imunološkom blotingu. Negativan rezultat ne zahtijeva potvrdu.
Primarni stadij (screening) testiranja na HIV.
Pažnja! Prilikom prolaska studije AT i AG na HIV 1/2 za primarnu studiju probira u skladu sa zakonodavstvom Ruske Federacije Obavezno dostaviti sljedeće podatke i dokumente:
1) Za stanovnike Moskve i Moskovske regije
- Puno ime
- Dan, mjesec i godina rođenja
- Podaci o registraciji
- Putovnica
- Polica osiguranja (serija i broj police osiguranja, naziv osiguravajućeg društva).
- Puno ime
- Dan, mjesec i godina rođenja
- Podaci o registraciji
- Polica osiguranja (serija i broj police osiguranja, naziv osiguravajućeg društva)
- Fotokopija (sken) putovnice
Analizu možete predati anonimno: u ovom slučaju, pacijent se registrira kao anoniman s pojedinačnim rednim brojem (točka 2, članak 8 Saveznog zakona Ruske Federacije br. 38-FZ), uz obveznu naznaku godine rođenja i mjesta prebivališta ( subjekt Ruske Federacije).
Skrenuti pozornost na!
Da su rezultati primarne (screening) studije samo rezultati laboratorijska istraživanja i nisu rezultat pregleda ili zaključka o prisutnosti ili odsutnosti HIV infekcije. Na temelju rezultata studije probira trebate se obratiti općinskom centru za AIDS radi dobrovoljnog pregleda na prisutnost HIV-a.
Rezultati testa na HIV, bez obzira na rezultat, izdaju se tek kada se pacijent osobno javi u laboratorij. Prilikom pregleda maloljetnika (mlađih od 14 godina) djece - zakonski zastupnik naveden u nalogu.
Nalazi se izdaju uz predočenje dogovora, predračuna i osobne isprave samog pacijenta ili punomoćnika pacijenta navedenog u narudžbi.
Rezultati istraživanja ne komuniciraju se telefonom ili e-poštom.
Ovim testom se testni uzorci seruma/plazme mogu istovremeno testirati na prisutnost antigena HIV tipa 1 i tipa 2 i antitijela na HIV tip 1 i tipa 2.
Virus humane imunodeficijencije pripada obitelji retrovirusa koji sadrže RNA i potporodici lentivirusa, tj. virusi spore infekcije. HIV je genetski i antigenski heterogen, po svojoj strukturi dijeli se na tipove 1 i 2. Kada se unese u ljudske stanice, virus formira segment DNK u njihovom genomu, koji kasnije stvara novi HIV u neograničenim količinama. Antigeni virusa pojavljuju se na površini oštećenih stanica. Odgovor na njihov izgled izvana imunološki sustav je stvaranje specifičnih protutijela na virus prvog ili drugog tipa. Tijekom posljednje tri godine, broj službeno registriranih osoba zaraženih HIV-om u Rusiji raste za geometrijska progresija. Brzo širenje HIV infekcije u zemlji moglo bi postati nekontrolirano. Stoga je jedan od glavnih zadataka u ovom trenutku korištenje naprednijih metoda za njegovu dijagnostiku, koje osiguravaju identifikaciju zaraženih osoba u najranijim fazama infekcije. Ove metode uključuju laboratorijske serološke testove koji određuju i proteinske strukture virusa i specifična protutijela na virus.
Dijagnoza HIV infekcije neophodna je za učinkovito liječenje. Za dijagnosticiranje AIDS-a provodi se standardni postupak pregleda bolesnika. Sastoji se od 2 faze:
- skrining;
- imunološki blotting.
Za postavljanje dijagnoze dodatno je propisan PCR, ekspresno testiranje.
Provođenje ELISA
Početna dijagnoza AIDS-a temelji se na korištenju laboratorijskih HIV proteina koji hvataju specifična antitijela. Nakon njihovog kontakta s enzimima testnog sustava, mijenja se boja indikatora. Zatim se promijenjena shema boja obrađuje pomoću posebne opreme, koja određuje rezultat ispitivanja.
Slična laboratorijska dijagnoza HIV infekcije pokazuje rezultat 21 dan nakon infekcije. Uz pomoć ELISA-e nemoguće je utvrditi prisutnost virusa. Ova dijagnostička metoda pomaže u otkrivanju proizvodnje protutijela na virus. Sličan proces može se promatrati 2-6 tjedana nakon infekcije.
Stručnjaci razlikuju 4 generacije ELISA sustava s različitim osjetljivostima. Liječnici često koriste testove 3. i 4. generacije. Ovi sustavi temelje se na rekombinantnim proteinima ili peptidima sintetskog podrijetla, koji imaju značajnu točnost i specifičnost. ELISA se koristi za otkrivanje, praćenje širenja virusa, što osigurava sigurnost pri provjeri darovane krvi. Točnost takvih sustava kreće se od 93-99%. Testovi izdani u zapadnoj Europi su osjetljiviji. Za provođenje dijagnostike laboratorijski pomoćnik uzima vensku krv (5 ml). 8 sati prije studije preporučuje se odbiti jesti. Studija se češće provodi ujutro.
Dešifriranje podataka
Bit će potrebno 10 dana da se dobiju rezultati testa. Ako je rezultat negativan, pacijent nije zaražen. U ovom slučaju liječenje nije propisano. Otkriven je lažno negativan rezultat:
- do 3 tjedna nakon infekcije;
- u posljednjoj fazi AIDS-a s niskim imunološkim sustavom;
- s nepravilnom pripremom krvi.
Ako je rezultat pozitivan, tada je pacijent zaražen. U tom slučaju provodi se IB. Lažno pozitivan rezultat ukazuje na prisutnost popratnih bolesti i nepravilno provedenu pripremu krvi. Ako je testiranje indicirano za trudnice, tada u prikupljenom materijalu liječnik može otkriti nespecifična protutijela čija proizvodnja nije povezana s virusom. Prikupljeni materijal se ispituje u referentnom ili arbitražnom laboratoriju. Ako je rezultat ponovnog testiranja negativan, tada je prvi rezultat lažan. U tom slučaju IB se ne provodi.
Izvođenje imunološke analize
Liječenje AIDS-a provodi se kada se dobije pozitivan rezultat imunološkog blotinga. Ova dijagnostička metoda provodi se pomoću nitrocelulozne trake na koju su naneseni virusni proteini. Za IB upotrebu venske krvi, koji se zatim obrađuje. Proteini koji se nalaze u sirutki podijeljeni su u skupine na temelju naboja i molekularne težine. Za izvođenje ovog postupka koristi se posebna oprema.
Ako u ispitivanom materijalu postoje protutijela na virus, na traci se pojavljuju odgovarajuće linije. Pozitivan IB ukazuje da je pacijent zaražen HIV-om. Sumnjiv rezultat otkriva se u početnim fazama infekcije, s tuberkulozom i onkologijom, kod trudnica. U takvim slučajevima preporuča se ponoviti IB.
Neodređeni IB rezultat ukazuje na prisutnost jednog ili više proteina virusa u imunoblotu. Slična se slika opaža s nedavnom infekcijom, kada postoji mala količina protutijela na infekciju u krvi. U tom će slučaju IB nakon nekog vremena biti pozitivan. Neizvjestan rezultat ovu studiju mogu biti povezani s odsutnošću HIV infekcije kod hepatitisa, kroničnih metaboličkih bolesti, tijekom trudnoće. U tom će slučaju IB postati negativan ili će stručnjaci identificirati uzrok nesigurnog rezultata kod pacijenta.
PCR studija
Obrambeni sustav je pogođen u pozadini uvođenja virusa u ljudsko tijelo. Razdoblje inkubacije je obično 3 mjeseca. Stoga se nakon seksualnog kontakta s partnerom zaraženim HIV-om preporučuje proći PCR dijagnostiku. Omogućit će vam određivanje RNA virusa. Razdoblje tijekom kojeg se preporučuje proći takvu studiju je 8-24 mjeseca.
Za konačnu dijagnozu indicirano je redovito davanje krvi za HIV (1 put u 3 mjeseca). Zbog svoje visoke osjetljivosti, ovaj pregled omogućuje otkrivanje virusa 10 dana nakon infekcije. Lažno pozitivan rezultat PCR-a također se može dobiti ako je u tijelu pacijenta prisutna druga infekcija. PCR istraživanje smatra se skupim postupkom, jer zahtijeva posebnu opremu.
PCR je propisan za otkrivanje virusa kod sljedećih osoba:
- novorođenče rođeno od majke zaražene HIV-om;
- bolesnika s upitnim IB-om.
Također, ova tehnika je prikazana za kontrolu koncentracije virusa u krvi i proučavanje krvi davatelja.
Brze metode istraživanja
U suvremene metode dijagnosticiranja AIDS-a stručnjaci ubrajaju brze testove. Za njihovo dešifriranje bit će potrebno 10-15 minuta. Imunokromatografski testovi temeljeni na kapilarnom protoku omogućuju točne rezultate. Takvi sustavi za testiranje predstavljeni su u obliku posebnih traka na koje se nanosi krv ili slina. U prisutnosti virusa, nakon 10 minuta na testu se pojavljuju 2 trake:
- kontrolirati;
- boja.
U ovom slučaju rezultat testa je pozitivan. Negativan rezultat označava se pojavom jedne kontrolne trake. Za potvrdu dobivenog rezultata provodi se IB. Na temelju općih podataka, liječnik postavlja dijagnozu i propisuje liječenje.
Virus možete otkriti kod kuće. Za to se koriste posebni ekspresni setovi. OraSure Technologies1 je sustav razvijen u SAD-u. Ako se nakon testiranja pronađe pozitivan rezultat, pacijentu se preporuča podvrgnuti potpunom pregledu u medicinskom centru.
Pregled djeteta
Novorođenčad rođena od zaraženih majki hitno se pregledava. Uz pomoć seroloških metoda nemoguće je točno otkriti virus kod djece u dobi od 5-18 mjeseci. Ali rezultat takve ankete važan je kod provođenja IB-a.
Infekciju kod djece možete otkriti pomoću PCR-a. DNK virusa otkriva specijalist kod djece prvog mjeseca života. Da bi se odredila koncentracija RNA patogena, stručnjaci određuju provirus imunodeficijencije. Za istraživanje liječnik koristi punu krv ili njezino osušeno mjesto. Materijal se stavlja u epruvetu s EDTA konzervansom (omjer 1:20). Uzorak se mora čuvati na temperaturi ne višoj od 8°C (2 dana). Zamrzavanje materijala nije dopušteno.
Da bi se dobio uzorak suhe krvi, cijela tekućina se nanosi na poseban papir. Uzorak se može čuvati ispod 8°C. Kartice se koriste 8 mjeseci. Novorođenče mora biti pregledano, uzimajući materijal za istraživanje, u sljedećim razdobljima:
- 48 sati nakon rođenja;
- u dobi od 2 mjeseca nakon rođenja;
- 3-6 mjeseci nakon rođenja.
Ako je liječnik otkrio gen HIV provirusa nekoliko sati nakon rođenja djeteta, tada je dijete zaraženo intrauterino. Virus se također može dobiti tijekom poroda ili tijekom dojenje. Rezultati koji ukazuju na prisutnost DNK virusa u 2 uzorka ukazuju na razvoj AIDS-a kod djeteta. Dispanzersko promatranje nije potrebno ako su PCR rezultati negativni 4 mjeseca nakon rođenja djeteta.
Ako je rezultat testa negativan, ali su prisutni simptomi AIDS-a, preporuča se konzultirati liječnika. Takvu kliniku mogu potaknuti druge bolesti. Testiranje se smatra jedinom i stopostotnom metodom za dijagnosticiranje virusa. Čak ni kvalificirani i iskusni stručnjaci ne mogu identificirati virus prema simptomima koje predstavlja.
Ako nakon nekog vremena rezultati pacijenta budu negativni, tada u tijelu nema HIV-a.
Ne uzima u obzir simptome. Ali takva klinička slika može biti povezana s fobijom od AIDS-a. U ovom slučaju potrebna je pomoć psihologa. Ako je potrebno, djetetu ili odrasloj osobi propisano je odgovarajuće liječenje.
Postoje dva široka, ali vrlo dobro definirana cilja za testiranje ili probir na HIV protutijela – otkrivanje slučajeva i nadzor. U identificiranju slučajeva, prvi korak je razjasniti HIV status svakog pojedinca kako bi se započelo odgovarajuće liječenje ili praćenje odgovarajućim mjerama.
Svrha epidemiološkog nadzora je procijeniti prevalenciju HIV-a, distribuciju slučajeva infekcije i njezino kretanje u skupini ili cijeloj populaciji.
Osjetljivost testa na antitijela na HIV je mjera njegove sposobnosti da točno otkrije ta antitijela u uzorku, dok je specifičnost testa mjera njegove sposobnosti da točno potvrdi odsutnost antitijela kada ih nema u uzorku. U idealnom slučaju, osjetljivost i specifičnost testa trebale bi doseći 100%. U praksi nijedan biološki test ne zadovoljava ovaj zahtjev, a ipak su testovi na antitijela na HIV među najosjetljivijim i najspecifičnijim testovima koji su trenutno dostupni.
Laboratorijska dijagnoza AIDS-a sastoji se u provođenju viroloških, seroloških, imunoloških studija materijala pacijenata sa sumnjom na AIDS.
U virološkim studijama, primarne kulture mononuklearnih stanica krvi mogu se koristiti za izolaciju virusa. Izolacija i identifikacija virusa je metodički teška i može se izvesti u specijaliziranim laboratorijima. Najviše učinkovita metoda Dijagnostika koja se trenutno koristi za rutinske masovne preglede je otkrivanje antitijela na virus humane imunodeficijencije. Antitijela na HIV mogu se pojaviti do kraja prvog mjeseca infekcije. Prema brojnim autorima, razvoj serokonverzije zahtijeva od 4-7 tjedana do 6 mjeseci ili više. Prisutnost antitijela je dijagnostička vrijednost sa AIDS-om ili ukazuje na rizik od njegovog razvoja. Antitijela nisu samo serološki marker AIDS-a. Otkriveni u pretkliničkoj fazi bolesti, omogućuju njezino rano dijagnosticiranje. Njihova prisutnost dobiva posebno značenje za detekciju kliconoša. Antitijela se otkrivaju dugi niz godina, gotovo tijekom cijelog života. Istraživači su utvrdili paralelizam u otkrivanju virusa i antitijela na njega, odnosno prisutnost antitijela na virus imunodeficijencije ukazuje na veliku vjerojatnost da je osoba nositelj virusa.
Protutijela na HIV antigen, koja su se pojavila u razdoblju inkubacije, nastavljaju se intenzivno proizvoditi s razvojem bolesti, budući da antigensku iritaciju stimuliraju i virioni oslobođeni iz zaraženih limfocita i komponente subviriona koje ulaze u krvotok tijekom raspadanja inficiranim stanicama i inficiranim limfocitima. Istovremeno, provirus ugrađen u genom zaraženih stanica ostaje nedostupan specifičnim antitijelima. To objašnjava naizgled paradoksalnu činjenicu: što je više antitijela na virus humane imunodeficijencije u krvnom serumu, to je lakše izolirati sam virus od bolesnika. To se događa jer protutijela proizvedena kao odgovor na virusnu infekciju nisu neutralizirajuća i stoga nemaju zamjetan učinak na virus, već su jednostavno prisutna u tijelu zajedno s njim. Za otkrivanje protutijela (AT) na virus AIDS-a razvijen je niz testova koji omogućuju provođenje istraživanja na dovoljno visokoj razini specifičnosti i osjetljivosti. To su metode radioimunotestiranja na čvrstoj fazi, radioimunoprecipitacije, imunofluorescencije, enzimskog imunotestiranja i imunološkog blotinga. Najširu primjenu u praksi pronašle su metode imunoenzimskog testa (ELISA), koje karakterizira visoka osjetljivost, mogućnost kvantitativnog i vizualnog bilježenja rezultata reakcije, što metodu čini dostupnom laboratorijima svih razina. ELISA koristi strane i domaće test sustave.
Treba biti oprezan s djecom rođenom od zaraženih majki. U nedostatku klinike, dijete se smatra zaraženim ako AT na HIV potraje nakon godinu dana. Po primitku pozitivnog nalaza u ELISA testu, potrebno je tri puta testirati serume koji su dali jednokratni pozitivan nalaz, te potvrditi pozitivan nalaz u neovisnom sustavu – imunološki blotting.
Detekcija AT u ELISA reakciji ne daje dovoljno informacija, jer ne ukazuje na stanje subjekta, već samo na inkubaciju, bolest ili prisutnost asimptomatske infekcije. Imunološki bloting daje više informacija, budući da je prisutnost AT na mnogo HIV antigena karakteristična za tešku bolest, dok je reakcija s 1-2 antigena karakterističnija za blagi infektivni proces
Informativno je izračunavanje broja T (pomagača) i omjera T4 prema Te (supresori) limfocita, određeno pomoću mono-kponalnih protutijela. Važan kriterij za bolest može biti nagli porast broja imunoglobulina, osobito A i V. Općenito klinička analiza krv o bolesti može ukazivati na limfopeniju, leukopeniju, eritropeniju, trombocitopeniju, eozinofiliju.
Testovi na HIV koji se koriste za epidemiološki nadzor ne moraju biti točni kao oni potrebni za kliničke svrhe. Međutim, pri vrlo niskoj prevalenciji HIV-a u populaciji, sve pozitivne uzorke treba ponovno testirati dodatnim testovima.
Prikupljanje krvi za testiranje na antitijela na HIV ili za probir može biti popraćeno upisom imena ispitanika (upis imena) ili bez upisivanja prezimena ili individualnih identifikacijskih podataka (anonimno vađenje) (Tablica 2).
Anonimni probir bez identifikacijskih podataka karakteriziraju sljedeće točke: koriste se uzorci krvi prikupljeni u druge svrhe; anonimnost je zajamčena zbog činjenice da se nikakvi identifikacijski podaci ne prikupljaju niti uzimaju u obzir; nije potrebna suglasnost ispitanika; nije potreban kontakt sa savjetovalištem i socijalnim službama; konačno, i najvažnije, pogreške u statističkim procjenama, ovisno o razini sudjelovanja stanovništva, svedene su na minimum.
Iako se točniji podaci mogu dobiti anonimnim testiranjem na HIV, ova metoda ima sljedeće nedostatke: ne može eliminirati potencijalnu pristranost odabira; podaci o visokorizičnom ponašanju i drugim važnim varijablama nisu dostupni i ne mogu se prikupljati retrospektivno; nije moguće uspostaviti kontakt s osobama zaraženim HIV-om kako bi ih se informiralo o njihovom stanju; pregled se može provoditi samo u skupinama osoba čija se krv uzima u druge svrhe.
U područjima gdje se prevalencija HIV-a smatra vrlo niskom, nadzor unutar sustava zdravstvene zaštite trebao bi se primarno usredotočiti na pojedince ili populacije s najrizičnijim ponašanjem. spolni partneri
Krv za testiranje na HIV u ovoj rizičnoj skupini najlakše je dobiti u centrima specijaliziranim za liječenje spolno prenosivih bolesti ili sličnim ustanovama. Ako je intravenozno korištenje droga također uobičajeno, uzorke krvi treba uzeti od korisnika droga u specijaliziranim ustanovama. Obično će biti dovoljno prikupljanje krvi jednom svaka 3 ili 6 mjeseci u najrizičnijim skupinama iz zemljopisnih područja gdje su takve skupine najbrojnije. Izuzetak mogu biti rizične skupine poput intravenoznih ovisnika, kojima će možda trebati češće preglede.
Sada WHO razvija sustav za klasifikaciju (staging) bolesti za klinička istraživanja, koji se također može koristiti u ispitivanjima liječenja, što također može imati prediktivnu vrijednost. Međutim, takav sustav nije namijenjen zamjeni postojećih definicija AIDS-a koje se koriste u nadzoru zdravstvene zaštite.
Trenutno se posvuda razvijaju sustavi planiranog (rutinskog) nadzora HIV-a. Ove sustave potrebno je prilagoditi trenutnoj epidemiološkoj situaciji; stoga se metode uzorkovanja u populacijama s vrlo niskom prevalencijom virusa nužno moraju razlikovati od onih koje se koriste tamo gdje je prevalencija umjerena ili visoka.
Takav nadzor uključuje rutinske preglede dobro definiranih i dostupnih populacija. Prije svega treba obuhvatiti one skupine koje su najrizičnije zaražene, au svakoj od tih skupina treba odabrati konstantan unaprijed određen broj pojedinaca za pregled.
Posljednjih godina anonimni probir u vidljivim skupinama bez obzira na identifikacijske podatke postao je sve češći kao točan i isplativ učinkovita metoda epidemiološkog nadzora HIV infekcije u zdravstvenom sustavu.