Bakteriofagi, strukturne značilnosti in praktična uporaba. Genetska rekombinacija med transformacijo

omejena (specifična) transdukcija- Prenos z bakterijskega darovalca na bakterijskega prejemnika s pomočjo bakteriofaga strogo določenega fragmenta bakterijske DNK, ki se nahaja v bližini integracijskega mesta bakteriofaga (praviloma več genov); na bakteriofage, ... ... Priročnik tehničnega prevajalca

Ta izraz ima druge pomene, glejte Transdukcija. Transdukcija (iz latinščine transductio mobile) je proces prenosa bakterijske DNK iz ene celice v drugo z bakteriofagom. Splošna transdukcija se uporablja v bakterijski genetiki za ... ... Wikipedia

Glejte Specifična transdukcija ... Velik medicinski slovar

- (iz latinščine transductio gibanje) prenos genskega materiala iz ene celice v drugo s pomočjo virusa (Glejte Virusi), kar vodi do spremembe dednih lastnosti celic prejemnic. Fenomen T. so odkrili ameriški znanstveniki D ... Velika sovjetska enciklopedija

- (sin. T. lokaliziran) T., v katerega se prenese strogo določen del deoksiribonukleinske kisline bakterije ... Veliki medicinski slovar

Specializirana (posebna, omejena) transdukcija Prenos z bakterijskega darovalca na bakterijskega prejemnika z uporabo bakteriofaga strogo določenega fragmenta bakterijske DNK, ki se nahaja v bližini ... ... Molekularna biologija in genetika. Slovar.

Omejena transdukcija specifična t- Omejena transdukcija ali posebna t. prenos s pomočjo bakteriofaga od bakterijskega darovalca do bakterijskega prejemnika strogo določenega fragmenta ... ... Genetika. enciklopedični slovar

- (grško baktērion stick) enocelični mikroorganizmi s primitivno citoplazmo in jedrom brez nukleola in jedrne membrane. Spadajo med prokariote. Skupaj z drugimi mikroorganizmi so zelo razširjeni v tleh, vodi, zraku, naseljujejo ... ... Medicinska enciklopedija

Izraz bacteriophage Angleški izraz bacteriophage Sinonimi phages, bakterijski virusi Okrajšave Povezani izrazi biološki nanoobjekti, DNK, kapsid, nanofarmakologija, vektorji na osnovi nanomaterialov Opredelitev (iz bakterij in grščine ??????… … Enciklopedični slovar nanotehnologije

- (lat. transductio prenos, gibanje; Trans + ducto svinec, svinec) prenos z bakteriofagom genskega materiala (mesto deoksiribonukleinske kisline) iz ene bakterije (donorja) do druge (prejemnika); vodi do spremembe genotipa bakterije ... ... Medicinska enciklopedija

Učbenik je sestavljen iz sedmih delov. Prvi del - "Splošna mikrobiologija" - vsebuje informacije o morfologiji in fiziologiji bakterij. Drugi del je posvečen genetiki bakterij. Tretji del - "Mikroflora biosfere" - obravnava mikrofloro okolja, njeno vlogo v kroženju snovi v naravi, pa tudi človeško mikrofloro in njen pomen. Četrti del - "Nauk o okužbi" - je posvečen patogenim lastnostim mikroorganizmov, njihovi vlogi pri infekcijski proces vsebuje pa tudi informacije o antibiotikih in njihovih mehanizmih delovanja. Peti del - "Nauk o imuniteti" - vsebuje sodobne ideje o imuniteti. Šesti del – »Virusi in bolezni, ki jih povzročajo« – podaja informacije o glavnih bioloških lastnostih virusov in boleznih, ki jih povzročajo. Sedmi del - "Zasebna medicinska mikrobiologija" - vsebuje informacije o morfologiji, fiziologiji, patogenih lastnostih mnogih patogenov. nalezljive bolezni, pa tudi približno sodobne metode njihova diagnoza, specifična preventiva in terapija.

Učbenik je namenjen študentom, podiplomskim študentom in učiteljem visokošolskih zdravstvenih ustanov, univerz, mikrobiologom vseh specialnosti in praktikom.

5. izdaja, popravljena in razširjena

knjiga:

Od nespecifičnega se razlikuje po tem, da v tem primeru transducirajoči fagi vedno nosijo le določene gene, in sicer tiste, ki se nahajajo na kromosomu lizogene celice levo od attL ali desno od attR. Specifična transdukcija je vedno povezana z integracijo zmernega faga v kromosom gostiteljske celice. Ko zapusti (izključitev) iz kromosoma, lahko profag zajame gen z levega ali desnega boka, na primer gal ali bio. Toda v tem primeru mora z nasprotnega konca izgubiti enako velikost DNK, tako da njegova skupna dolžina ostane nespremenjena (sicer ga ni mogoče zapakirati v glavo faga). Zato pri tej obliki izključitve nastanejo defektni fagi: ?dgal ali ?dbio.

specifična transdukcija pri E. coli izvaja ne samo lambda fag, ampak tudi sorodne lambdoidne in druge fage. Odvisno od lokacije attB mest na kromosomu, ko so izključena, lahko vklopijo različne bakterijske gene, povezane s profagom, in jih transducirajo v druge celice. Material, vključen v genom, lahko nadomesti do 1/3 genskega materiala faga.

Transducirajoči fag se v primeru okužbe celice prejemnice integrira v njen kromosom in vanj vnese nov gen (novo lastnost), ki ne posreduje le lizogenizacije, temveč tudi lizogeno pretvorbo.

Če je torej med nespecifično transdukcijo fag le pasivni nosilec genskega materiala, potem med specifično transdukcijo fag ta material vključi v svoj genom in ga, lizogenizirajoče bakterije, prenese na prejemnika. Vendar pa lahko do lizogene pretvorbe pride tudi, če zmerni genom faga vsebuje lastne gene, ki v celici niso, so pa odgovorni za sintezo esencialnih beljakovin. Na primer, samo tisti povzročitelji davice imajo sposobnost tvorbe eksotoksina, v kromosom katerega je integriran zmerni profag, ki nosi tox operon. Odgovoren je za sintezo davičnega toksina. Z drugimi besedami, zmerni toksični fag povzroči lizogeno pretvorbo netoksičnega bacila davice v toksigeno.

Metoda plasti agarja je naslednja. Najprej se v posodo vlije plast hranilnega agarja. Po strjevanju dodamo tej plasti 2 ml 0,7 % agarja, stopljenega in ohlajenega na 45 °C, ki mu najprej dodamo kapljico koncentrirane bakterijske suspenzije in določen volumen suspenzije faga. Ko se zgornja plast strdi, se skodelica postavi v termostat. Bakterije se razmnožujejo znotraj mehke plasti agarja in tvorijo neprekinjeno neprozorno ozadje, na katerem so kolonije fagov jasno vidne v obliki sterilnih madežev (slika 84, 2). Vsaka kolonija nastane z razmnoževanjem enega starševskega viriona faga. Uporaba te metode omogoča: a) s štetjem kolonij natančno določitev števila živih virionov fagov v danem materialu;

b) po značilnosti(velikost, preglednost itd.) za preučevanje dedne variabilnosti fagov.

Po spektru njihovega delovanja na bakterije delimo fage na polivalentna(lizi sorodne bakterije, na primer polivalentni fag salmonele lizira skoraj vso salmonelo), monofagi(lizirajo bakterije samo ene vrste, na primer fag Vi-I lizira le povzročitelje trebušnega tifusa) in specifične za tip fagi, ki selektivno lizirajo posamezne različice bakterij znotraj vrste. S pomočjo takšnih fagov se izvede najbolj subtilna diferenciacija bakterij znotraj vrste z njihovo delitvijo na fagne variante. Na primer, z uporabo nabora fagov Vi-II je povzročitelj tifusa razdeljen na več kot 100 variant fagov. Ker je občutljivost bakterij na fage relativno stabilna lastnost, povezana s prisotnostjo ustreznih receptorjev, je tipizacija fagov velikega diagnostičnega in epidemiološkega pomena.

riž. 84. Odkrivanje bakteriofagov v testnem materialu:

1 - točkovni test; 2 - titracija po Grazii

Transformacija

Transformacija je prenos čiste DNK iz ene celice v drugo. Transformacijo je odkril bakteriolog F. Griffiths leta 1928 v poskusih s pnevmokoki. Pri pnevmokokih sta znani dve vrsti sevov: S- in R-oblika.

Za S-obliko je značilna prisotnost polisaharidne kapsule, zaradi katere pri umetnem gojenju tvori gladke, sijoče kolonije; ta oblika je patogena za miši. R-oblika nima kapsule, pri umetnem gojenju tvori grobe kolonije; ta oblika je nepatogena za miši. Če pa miši hkrati injiciramo ubite S-celice in žive R-celice, miši umrejo. Zato genetske lastnosti enega seva vplivajo na genetske lastnosti drugega seva.

Leta 1944 so O. Avery, K. McLeod in M. McCarthy dokazali, da so spremembe dednih lastnosti celic povezane s prenosom DNK.

Sposobnost celice za preobrazbo je možna v njenem posebnem stanju, ki se imenuje kompetenca. V kompetentnih celicah se spremeni sestava celične stene in plazmaleme: stena postane porozna, plazmalema tvori številne invaginacije, na zunanji površini pa se pojavijo posebni antigeni - faktorji kompetenc (zlasti specifični proteini z nizko molekulsko maso).

V naravnih pogojih se zunajcelična čista DNK tvori med smrtjo (lizo) prokariotov.

Praviloma pride do transformacije znotraj ene vrste prokariotov, v prisotnosti homolognih genov pa opazimo tudi medvrstno transformacijo.

Proces preoblikovanja vključuje naslednje faze:

1. Pritrditev transformacijske dvoverižne DNK na receptorje na površini celice prejemnice.

2. Transformacija dvoverižne DNK v enoverižno.

3. Prodor enoverižne DNK v celico.

4. Integracija transformacijske DNK v prejemnikov kromosom in rekombinacija genskega materiala.

Dolžina transformacijske DNK mora biti od 500 do 200 tisoč bp. Energija, ki se sprosti med razgradnjo ene od verig DNK, se uporablja za aktivni transport preostale verige v celico.

Prve tri stopnje transformacije niso odvisne od nukleotidne sestave DNK. Vendar pa je proces integracije transformacijske DNK v prejemnikov kromosom bolj verjeten, če je ta DNK zelo homologna s prejemnikovo DNK.

Postopek preoblikovanja je prikazan na diagramu. Vsak odsek črte ustreza eni verigi DNK. Transformirajoča DNK je prikazana v črni barvi, DNK celice prejemnice pa v sivi.

V prvem koraku se transformirajoča DNK veže na receptorska mesta na površini celice prejemnice.

Na drugi stopnji se dvoverižna DNK na celični površini pretvori v enoverižna DNK zaradi cepitve ene od verig z bakterijskimi nukleazami.

V tretjem koraku se preostala veriga DNK prenese čez membrano v citoplazmo. V tem primeru se uporabi energija, ki se sprosti med razgradnjo komplementarne verige.

Med podvajanjem bakterijskega kromosoma se transformirajoča DNK veriga pritrdi na homologno (delno komplementarno) DNK regijo prejemnice celice. V tem primeru zaradi pomanjkanja popolne komplementarnosti nastane heterodupleks ("molekularni heterozigot") - odsek dvoverižne DNK, na katerem dušikove baze niso povezane z vodikovimi vezmi v vseh nukleotidnih parih. Preostali del DNK se normalno replicira.

Po koncu replikacije DNK se celica prejemnica razdeli v dve celici: delno transformirano celico s kromosomom, ki vključuje heterodupleksno regijo DNK, in netransformirano celico. Med replikacijo DNK v delno transformirani celici se na obeh verigah DNK dokončajo komplementarne verige. Ena veriga obdrži prvotne nukleotidne sekvence, druga pa se popolnoma transformira. Po delitvi delno transformirane celice nastaneta ena netransformirana celica in ena popolnoma transformirana celica, v kateri se originalno nukleotidno zaporedje nadomesti z nukleotidnim zaporedjem transformirajoče DNK.

Tako transformacija ne vključuje dodajanja novih genov, temveč zamenjavo genov prejemnikov s homolognimi nukleotidnimi sekvencami.

Pogostost transformacije pri prokariotih je odvisna od lastnosti transformirajoče DNK, od njene koncentracije, od stanja celice prejemnice in od vrste bakterije. Največja frekvenca transformiranih celic ne presega 1 na 100 celic.

Transformacija je znana tudi pri evkariontih. Vendar na površini evkariontskih celic ni receptorskih mest, transformirajoča DNK pa je umetno vnesena v celice. Na primer, DNK se injicira v živalska jajčeca z neposredno mikroinjektacijo in v rastlinska jajčeca z mikroinjiciranjem v cvetni prah.

Transdukcija je prenos genskega materiala z virusi iz celice darovalca v celico prejemnico.

Fenomen transdukcije je leta 1951 odkril N. Zinder (učenec J. Lederberga).

Med transdukcijo DNK gostiteljske celice vstopi v virione. Virioni okužijo druge celice in DNK prvotne bakterijske celice vstopi v drugo bakterijsko celico. Virusna DNK se integrira v bakterijski kromosom, vnesena bakterijska DNK pa se rekombinira z DNK bakterijskega kromosoma. Posledično se 50% celic preobrazi.

Obstajajo splošna (nespecifična), omejena (specifična) in abortivna transdukcija.

Splošna transdukcija

Pri popolni transdukciji se fragmenti bakterijske DNK od darovalca naključno vključijo v zoreči delec faga skupaj z ali namesto fagne DNK. Fragmenti bakterijske DNK nastanejo, ko jo razreže encim, ki ga nadzoruje fag. Fagni delec lahko vključuje do 100 bakterijskih genov.

Omejena transdukcija

Pri omejeni transdukciji pride do rekombinacije – bakterijska DNK nadomesti del DNK faga. Rekombinantna DNK vsebuje majhno število bakterijskih genov, ki mejijo na DNK faga, ki je integrirana v bakterijski kromosom.

S popolno in omejeno transdukcijo donorska DNK nadomesti homologne regije prejemnikove DNK. Ta proces je podoben transformaciji.

Abortivna transdukcija je lahko tako nespecifična kot specifična. Njegovo bistvo je v tem, da fragment DNK, ki ga transducira fag, ni vključen v prejemnikov kromosom, ampak obstaja kot citoplazemski replikon. Prej ali slej se ta replikon izgubi.

Fenomen transdukcije z virusi se pogosto uporablja pri prenosu genov pri evkariontih. Če se uporabi virus, ki ne more tvoriti kapsida (to je, da obstaja samo v obliki DNK), se transdukcija bistveno ne razlikuje od transformacije ali od konjugativnega prenosa genskega materiala z uporabo plazmidnih vektorjev. Vektorski sistemi so bili ustvarjeni na podlagi modificiranih virusov SV40 (tvorijo do 100 tisoč kopij v celici), virusa herpesa, vakcinije in mozaika cvetače.

Še enkrat je treba poudariti, da vse opisane vrste rekombinacije niso povezane z dodajanjem novih segmentov DNK, temveč z zamenjavo obstoječih nukleotidnih zaporedij. Višja kot je stopnja homologije med transformirajočo in originalno DNK, večja je verjetnost uspešne rekombinacije. Najlažji način je rekombinacija encimov, ki so prisotni v vseh organizmih. Težje je v genom uvesti nove regulatorje z visoko specifičnostjo. Zato se za vnos novih genov v genom uporabljajo bolj zapletene metode, povezane z biokemičnimi modifikacijami DNK.

Transdukcija je prenos genskega materiala iz ene bakterijske celice v drugo z bakteriofagom. Transdukcijo sta leta 1952 odkrila N. Zinder in E. Lederberg na dveh avksotrofnih mutantih Salmonella typhimurium. Poskus je bil izveden v cevi v obliki črke /, ločeni s steklenim ultratankim poroznim filtrom. V en del je bil nameščen sev 2A, odvisen od histidina, v drugega pa od triptofana odvisen sev 22A. Čez nekaj časa so sintetizirali prototrofi. triptofan se je pojavil v kulturi seva 22A. Ugotovljeno je bilo, da je sev 22A vseboval fag (P22), ki je sposoben lizirati celice seva 2A. Ko je prodrl skozi stekleni filter, je fag P22 liziral celice seva 2A. Zato, ko je bila kultura 22A posejana na medij, ki ni vseboval triptofana, se je pojavila rast te kulture.
Študija vrednosti (po velikosti filtrskih por), hitrosti sedimentacije, občutljivosti na toploto tega filtrirnega sredstva je pokazala, da je identična tistim pri fagu P22. Na podlagi tega je bilo sklenjeno, da je fag, ki ga vsebuje kultura 22A, prešel skozi filter, okužil celice seva 2A, ki so bile nanj občutljive, in med razmnoževanjem v svoj genom vključil delček bakterijskega kromosoma tega seva. . Po sprostitvi iz liziranih celic je fag prešel nazaj v koleno epruvete, kjer so bile celice seva 22A. Ko so bile te celice okužene, je fag nanje prenesel preneseni fragment kromosoma celic seva 2A, ki so bile neodvisne od triptofana. Kot rezultat integracije tega fragmenta v kromosom celic seva 22A so nastale prototrofne rekombinante. V kulturi seva 2A se prototrofi niso pojavili, saj so bile celice lizirane.
Fag lahko nosi gene, ki so odgovorni za različne lastnosti celice: odpornost na antibiotike, proizvodnjo toksinov, prototrofijo. Med transdukcijo, pa tudi med transformacijo, se prenesejo le majhni fragmenti DNK - ne več kot 1/100 dolžine bakterijskega kromosoma.
Le nekateri zmerni fagi imajo lastnosti transdukcije, in sicer fagi, ki nosijo delček bakterijskega kromosoma kot del svojega genoma. Ti fagi so okvarjeni: ne vsebujejo celotnega nabora lastnih genov. Nekateri njihovi geni ostanejo v bakterijskem kromosomu (namesto odvzetih kromosomskih genov).
Obstajajo tri vrste transdukcije: splošna ali nespecifična, specifična in neuspešna.
Vrsta transdukcije je določena s pogoji za nastanek transducirajočih fagov.
Splošno transdukcijo izvajajo fagi, ki nastanejo med litičnim ciklom. Med intracelularno reprodukcijo faga se bakterijski kromosom uniči in njegovi posamezni naključni fragmenti so vključeni v zoreče delce faga. Velikost vključenega fragmenta je določena z zmogljivostjo glave faga. Na primer, transducijski fag P1 vključuje 2,3 % kromosoma E. coli, fag P22, katerega genom je 2,3-krat manjši od genoma P1 (zato je tudi zmogljivost glave manjša), vključuje 1 % kromosoma Salmonella. Pri posameznih transducirajočih fagih se lahko vsa njihova DNK nadomesti z bakterijsko DNK. Zato lahko takšni fagi nosijo poljubne kromosomske gene in so vključeni v kateri koli del prejemnikovega kromosoma. Fagi, ki zagotavljajo takšno transdukcijo, lahko nosijo gene, ki nadzorujejo prehranske potrebe bakterij, encimske lastnosti in odpornost proti zdravila, serološke in virulentne lastnosti, to je vse lastnosti celice darovalca.
Specifično transdukcijo izvajajo fagi, ki nastanejo kot posledica indukcije lizogenih bakterij (na primer z UV obsevanjem) ali s spontanim sproščanjem profaga iz kromosoma. V splošnih primerih lahko nastajajoči fag, ko je izključen iz kromosoma, v svoj genom vključi le bližnji segment kromosoma, pri čemer del svojega genoma pusti v kromosomu. Za razliko od splošnih transdukcijskih fagov, katerih genom prevladuje bakterijska DNK, je pri specifičnih transdukcijskih fagih glavni del genoma fagovna DNK. Med lizogenizacijo občutljivih bakterij je fagni genom specifične transdukcije povezan le z določenimi predeli bakterijskega kromosoma, to pomeni, da ima fag specifično točko pritrditve na kromosomu. Zato tak fag ob sprostitvi zajame le bližnjo strogo določeno regijo bakterijskega kromosoma in jo prenese v celico prejemnico. Ta sposobnost specifične transdukcije je bila ugotovljena pri E. coli fagu X, ki je med lizogenizacijo celice vedno fiksiran na bakterijskem kromosomu poleg genov, ki nadzorujejo fermentacijo galaktoze (galaktokinaza in galaktoziltransferaza) in jih transducira v celico prejemnico gal-. S specifično transdukcijo celica prejemnica prejme strogo določene gene.
Abortivna transdukcija poteka na enak način kot nespecifična transdukcija, vendar fragment kromosoma donorja, ki ga fag vnese v celico prejemnico, ni vključen v kromosom in se ne replicira, ampak se nahaja v citoplazmi celice. Ta fragment se med celično delitvijo prenese samo v eno hčerinsko celico in samo ta celica ima novo lastnost, ki jo nadzoruje vneseni gen donorske celice.
Transdukcijo je treba razlikovati od pretvorbe fagov. Med transdukcijo katere koli vrste pride do sprememb le v tistih celicah, okuženih s fagi, v katere je bila vnesena DNK bakterij donorjev, torej ki so bile okužene s transducirajočimi fagi. To je zelo majhna količina bakterijske populacije. Spremembe, ki jih povzročajo transducirani fagi, so zelo obstojne, prenesejo se na potomce in vztrajajo tudi, ko celica izgubi fag.
Faga in lizogena pretvorba sta spremembe fenotipa (lastnosti celice), ki jih povzroči okužba celice z zmernim fagom. Spremembe tukaj povzročajo geni faga. Lahko neposredno nadzorujejo sintezo posameznega fragmenta ali pa v interakciji z bakterijskimi povzročijo spremembo fenotipa celice. Najpogosteje pretvorba fagov vpliva na sintezo ali aktivnost encimov, ki nadzorujejo tvorbo celičnih komponent, kar spremljajo spremembe v morfologiji kolonij. Tako lizogenizacija grobih sevov mikobakterij vodi do tvorbe gladkih kolonij. Spremembo občutijo vse celice, okužene s fagom (enojne med transdukcijo). Med pretvorbo faga spremembe v bakterijskem fenotipu vztrajajo, dokler je fag prisoten v celici.

Specifična transdukcija

Od nespecifičnega se razlikuje po tem, da v tem primeru transducirajoči fagi vedno nosijo le določene gene, in sicer tiste, ki se nahajajo na kromosomu lizogene celice levo od attL ali desno od attR. Specifična transdukcija je vedno povezana z integracijo zmernega faga v kromosom gostiteljske celice. Ko zapusti (izključitev) iz kromosoma, lahko profag zajame gen z levega ali desnega boka, na primer gal ali bio. Toda v tem primeru mora z nasprotnega konca izgubiti enako velikost DNK, tako da njegova skupna dolžina ostane nespremenjena (sicer ga ni mogoče zapakirati v glavo faga). Zato s to obliko izključitve prir.

specifična transdukcija pri E. coli izvaja ne samo lambda fag, ampak tudi sorodne lambdoidne in druge fage. Odvisno od lokacije attB mest na kromosomu, ko so izključena, lahko vklopijo različne bakterijske gene, povezane s profagom, in jih transducirajo v druge celice. Material, vključen v genom, lahko nadomesti do 1/3 genskega materiala faga.

Transducirajoči fag se v primeru okužbe celice prejemnice integrira v njen kromosom in vanj vnese nov gen (novo lastnost), ki ne posreduje le lizogenizacije, temveč tudi lizogeno pretvorbo.

Če je torej med nespecifično transdukcijo fag le pasivni nosilec genskega materiala, potem med specifično transdukcijo fag ta material vključi v svoj genom in ga, lizogenizirajoče bakterije, prenese na prejemnika. Vendar pa lahko do lizogene pretvorbe pride tudi, če zmerni genom faga vsebuje lastne gene, ki v celici niso, so pa odgovorni za sintezo esencialnih beljakovin. Na primer, samo tisti povzročitelji davice imajo sposobnost tvorbe eksotoksina, v kromosom katerega je integriran zmerni profag, ki nosi tox operon. Odgovoren je za sintezo davičnega toksina. Z drugimi besedami, zmerni toksični fag povzroči lizogeno pretvorbo netoksičnega bacila davice v toksigeno.

Metoda plasti agarja je naslednja. Najprej se v posodo vlije plast hranilnega agarja. Po strjevanju dodamo tej plasti 2 ml 0,7 % agarja, stopljenega in ohlajenega na 45 °C, ki mu najprej dodamo kapljico koncentrirane bakterijske suspenzije in določen volumen suspenzije faga. Ko se zgornja plast strdi, se skodelica postavi v termostat. Bakterije se razmnožujejo znotraj mehke plasti agarja in tvorijo neprekinjeno neprozorno ozadje, na katerem so kolonije fagov jasno vidne v obliki sterilnih madežev (slika 84, 2). Vsaka kolonija nastane z razmnoževanjem enega starševskega viriona faga. Uporaba te metode omogoča: a) s štetjem kolonij natančno določitev števila živih virionov fagov v danem materialu;

b) po značilnih lastnostih (velikost, preglednost itd.) za preučevanje dedne variabilnosti fagov.

Po spektru njihovega delovanja na bakterije delimo fage na polivalentna(lizi sorodne bakterije, na primer polivalentni fag salmonele lizira skoraj vso salmonelo), monofagi(lizirajo bakterije samo ene vrste, na primer fag Vi-I lizira le povzročitelje trebušnega tifusa) in specifične za tip fagi, ki selektivno lizirajo posamezne različice bakterij znotraj vrste. S pomočjo takšnih fagov se izvede najbolj subtilna diferenciacija bakterij znotraj vrste z njihovo delitvijo na fagne variante. Na primer, z uporabo nabora fagov Vi-II je povzročitelj tifusa razdeljen na več kot 100 variant fagov. Ker je občutljivost bakterij na fage relativno stabilna lastnost, povezana s prisotnostjo ustreznih receptorjev, je tipizacija fagov velikega diagnostičnega in epidemiološkega pomena.